Ce produit, dsDNase (thermolabile), est une sensible à la chaleur à double brin recombinantly désoxyribonucléase, qui est exprimé par Pichia pastoris et dérivés de la crevette. La désoxyribonucléase spécifiquement à double brin clive le liaison phosphodiester dans l'ADN double brin de produire des oligonucléotides avec 5'-phosphate et extrémités 3'-hydroxyle. Ce produit a une forte spécificité, ne se dégradent pas l'ARN et l'ADN monocaténaire, et est sensible à la chaleur. Il peut être désactivé après traitement à 55 °C pendant 5 minutes. Ces caractéristiques sont très convenables pour rapidement et en toute sécurité la suppression de l'ADN génomique de la contamination de l'ARN des échantillons avant transcription inverse, de simplifier le flux de travail et de permettre à l'ADN génomique de la dépose et la synthèse d'adnc à être exécutées dans un tube unique.
Source : La désoxyribonucléase à partir de la crevette, expression recombinante dans Pichia pastoris.
Définition de l'activité enzymatique : dans les conditions de 25 °C et à pH 5.0, le montant de l'enzyme nécessaire pour augmenter le système de réaction A260 par 0,001 par minute avec l'ADN macromoléculaires comme substrat est défini comme une unité de l'activité enzymatique.
Pureté : SDS-PAGE la pureté de détection de ≥ 95 %.
L'inactivation ou d'inhibition : traitement à 55 °C pendant 5 min peuvent complètement inactiver dsDNase (thermolabile); agents chélateurs des ions métalliques, SDS, élevé en sel et de réduire les agents peuvent tous les inhiber l'activité enzymatique de dsDNase (thermolabile).
Tampon de stockage de l'enzyme : 25 mM Tris-HCl, 2 mM de MgCl2, 10 mM de NaCl, 0,01% de Triton X-100, 50% de glycérol, pH 7,5.
10×tampon de réaction : 200 mM Tris-HCl, 60 mM de MgCl2, pH 8.3.
Stockage et transport
Le transport dans la glace humide ; stockage à -20 °C, valide pour 12 mois.
Le
numéro de composant
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L'organe
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G
3408-50UL
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G3408-1
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DsDNase (thermolabile)
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50 μL
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G3408-2
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10×tampon de réaction
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100 μL
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Manuel
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1
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Étapes
1. Système de réaction recommandée :
L'organe
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Le volume
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DsDNase (thermolabile)
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1 μL
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10×tampon de réaction
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1 μL
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Échantillon de l'ARN
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Jusqu'à 8 μL
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L'eau exempte de nucléase
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À 10 μL
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Ajouter des échantillons selon le système de réaction ci-dessus, mélanger doucement, et incuber à 37 °C pendant environ 2 minutes pour éliminer efficacement la contamination de l'ADN double brin dans les échantillons de l'ARN.
2. Si le traité de l'ARN est par la suite de l'échantillon utilisé pour la transcription inverse, le système doit être chauffée à 55 °C pendant 5 minutes pour bien d'inactiver dsDNase (thermolabile).
Précautions
1. Produits enzymatiques devraient être stockés dans une boîte de glace ou sur la glace lorsque utilisé, et devrait être entreposé à -20 °C immédiatement après utilisation. Il est recommandé de stocker dans des aliquotes;
2. Pour votre sécurité et la santé, veuillez porter des blouses de laboratoire et des gants jetables pour l'opération.